Investigação da ocorrência do vírus Influenza C em um segmento populacional da região metropolitana de Belém, Pará

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http://patua.iec.gov.br//handle/iec/3113xmlui.dri2xhtml.METS-1.0.item-author
Pinho, Raimundo Adalberto Pacheco de
xmlui.dri2xhtml.METS-1.0.item-advisor
Sousa, Rita Catarina Medeiros dexmlui.dri2xhtml.METS-1.0.item-abstract
INTRODUÇÃO Os vírus Influenza pertencem à família Orthomyxoviridae e subdividem-se
em três gêneros: Influenzavirus A, Influenzavirus B e Influenzavirus C. Atualmente a atenção
dos órgãos responsáveis pela vigilância em saúde, quando se trata de Influenza, é destinada
exclusivamente aos vírus Influenza dos gêneros A e B, pela maior gravidade dos seus
sintomas e suas características epidemiológicas. Contudo, estudos mais recentes têm revelado
a importância das infecções causadas pelos Vírus influenza C. A epidemiologia do gênero
Influenzavirus C, até então associada a quadros brandos e assintomáticos de infecção
respiratória, carece de dados que elucidem sua sintomatologia e sazonalidade. Diferente dos
Vírus influenza A e B, a detecção deste agente infeccioso não está incluída na rotina de
diagnóstico dos laboratórios de saúde pública, ocasionando assim, um subdiagnóstico.
OBJETIVO Investigar a ocorrência do Vírus influenza C em pacientes com IRA em um
segmento populacional e compreender sua sazonalidade na região metropolitana de Belém.
MATERIAL E MÉTODOS Baseado no GenBank, foi construído um fragmento sintético de
DNA (gBblock-FluC) do gene M do Vírus influenza C. Este fragmento foi clonado utilizando.
O cDNA, proveniente da clonagem, foi submetido à reação de transcrição in vitro utilizando o
Kit MEGAscript SP6 (Invitrogen - Thermo Scientific) ou alternativamente o kit MEGAscript
T7 (Invitrogen- Thermo Scientific) para produção do RNA alvo, que foi quantificado, sendo
utilizado como controle positivo, após a realização de uma curva de diluições seriadas
(log10). A população de estudo compreendeu 274 indivíduos de ambos os sexos em diferentes
faixas etárias, com queixas sugestivas de infecção respiratória aguda, provenientes de serviços
de saúde da região metropolitana de Belém. O RNA viral foi extraído a partir do espécime
clínico utilizando-se o kit High Pure Viral nucleic acid kit (Roche, Indianapolis, USA),
seguindo as orientações do fabricante. A detecção do genoma viral foi realizada através RTqPCR
de acordo com protocolo já padronizado. Foram utilizados detectores (iniciadores e
sonda) específicos para o gene M do Vírus nfluenza C e para o gene da RNAseP humana
(RNP). O controle positivo (RNA sintético de influenza C) e os negativos (água livre de
DNAse e RNAse) foram incluídos em cada reação. A reação foi realizada no termociclador
7500 Real-Time PCR (Applied Biosystems - Thermo Scientific), com o kit comercial GoTaq
Probe 1-Step RT-qPCR System (Promega). RESULTADOS O genoma viral foi detectado em
0,36% (1/274) das amostras analisadas. O espécime positivo foi proveniente de um paciente
do sexo feminino, 22 anos de idade, a qual se encontrava no 3º trimestre gestacional. Os
sintomas principais foram dispneia, acompanhada de febre, tosse, mialgia, desconforto
respiratório, coriza, cafaleia, congestão nasal e afirmou ser portadora de bronquite asmática.
Este achado evidencia a circulação do Vírus influenza C no Brasil.
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PINHO, Raimundo Adalberto Pacheco de. Investigação da ocorrência do vírus Influenza C em um segmento populacional da região metropolitana de Belém, Pará. 53 f. Dissertação (Mestrado em Virologia) - Instituto Evandro Chagas, Programa de Pós-Graduação em Virologia, Ananindeua, 2016.xmlui.dri2xhtml.METS-1.0.item-local
Ananindeua / PAxmlui.dri2xhtml.METS-1.0.item-department
Núcleo de Ensino e Pós-Graduaçãoxmlui.dri2xhtml.METS-1.0.item-grantor
Instituto Evandro Chagasxmlui.dri2xhtml.METS-1.0.item-decsPrimary
Influenza Humana / diagnósticoVírus da Influenza A / patogenicidade
Vírus da Influenza B / patogenicidade
Genoma Viral
Influenzavirus C / isolamento & purificação