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dc.contributor.advisorCruz, Ana Cecília Ribeiropt_BR
dc.contributor.authorSouza, Mayque Paulo Miranda dept_BR
dc.date.accessioned2020-12-16T11:33:46Z-
dc.date.available2020-12-16T11:33:46Z-
dc.date.issued2020-
dc.identifier.citationSOUZA, Mayque Paulo Miranda de. Avaliação da expressão dos genes STING, cGAS e interferon do tipo I (α e β) em culturas primárias de células do sistema nervoso central de camundongos, infectadas com o vírus Zika. 78 f. Dissertação (Mestrado em Virologia) - Instituto Evandro Chagas, Programa de Pós-Graduação em Virologia, Ananindeua, 2020.pt_BR
dc.identifier.urihttp://patua.iec.gov.br//handle/iec/4210-
dc.description.abstractO Vírus Zika (ZIKV) é um arbovírus de RNA fita simples polaridade positiva, que compreende um única Open Reading Frame (ORF), utilizada para originar todas as proteínas virais. Os receptores de reconhecimento de padrão (PRRs) participam no processo de identificação de estruturas compartilhadas e conservadas de patógenos invasores. Dentre os PRRs, a via cGAS/STING é conhecida pela capacidade de detectar DNA citosólico, além de estar envolvida em infecções por alguns vírus de RNA, como o ZIKV, que dependendo do hospedeiro, pode se utilizar de diversos mecanismos para tentar contornar a resposta imune. O objetivo deste trabalho foi avaliar a expressão de genes envolvidos na via cGAS/STING, correlacionando com a cinética do ZIKV em culturas primárias de micróglias e neurônios de camundongos imunocompetentes. A susceptibilidade e permissividade das células foi confirmada mediante o ensaio de imunofluorescência indireta (IFI). Titulação em placa do sobrenadante de micróglias e neurônios foi realizado, e posteriormente, realizou-se extração, quantificação e normalização do RNA total para determinar a cinética viral por RT-qPCR com sonda TaqMan, para a expressão dos genes alvos, foi realizada RT-qPCR com SYBR Green. Por fim, a clivagem da proteína STING murina foi avaliada pelo ensaio de Western Blotting. O perfil de titulação em placa do sobrenadante determinado para micróglias e neurônios foi semelhante, com maiores títulos de unidades formadoras de placas (PFUs) em 1, 2, 3 e 4 dpi, respectivamente, para ambos os tipos celulares. A cinética do ZIKV foi semelhante em ambas células, com os maiores títulos virais encontrados no 2, 3, 1 e 4 dpi, respectivamente, enquanto que, o perfil de expressão dos genes cGAS, STING, INF-α e INF-β, foi bastante diferente nestes tipos celulares, incluindo supressão de alguns deles, como observado no caso do gene cGAS de neurônios, para todos os dias pós infecção investigados. Não foi constatada a clivagem da proteína STING de camundongos nas análises do perfil proteico. Em conclusão, a cinética do ZIKV foi semelhante em micróglias e neurônios de camundongos, porém, o perfil de expressão dos genes avaliados foi variado, o que indica que mesmo células de um mesmo hospedeiro e tecido, podem se comportar de maneira particular quando infectadas por este vírus. Sendo assim, a fim de obter uma melhor compreensão da dinâmica relação vírus-hospedeiro, mais estudos utilizando diferentes tipos celulares de um mesmo hospedeiro, bem como, comparando diferentes espécies, são necessários para ampliar o conhecimento acerca da patogênese do ZIKV, contribuindo assim, na orientação para o desenvolvimento de medicamentos e vacinas contra esse agente patogênico.pt_BR
dc.language.isoporpt_BR
dc.publisherInstituto Evandro Chagaspt_BR
dc.rightsAcesso Abertopt_BR
dc.titleAvaliação da expressão dos genes STING, cGAS e interferon do tipo I (α e β) em culturas primárias de células do sistema nervoso central de camundongos, infectadas com o vírus Zikapt_BR
dc.typeDissertaçãopt_BR
dc.subject.decsPrimarySistema Nervoso Central / virologiapt_BR
dc.subject.decsPrimaryInfecção por Zika viruspt_BR
dc.subject.decsPrimaryExpressão Gênica / genéticapt_BR
dc.subject.decsPrimaryCultura Primária de Célulaspt_BR
dc.subject.decsPrimaryInterferon-alfa / genéticapt_BR
dc.creator.affilliationMinistério da Saúde. Secretaria de Vigilância em Saúde. Instituto Evandro Chagas. Programa de Pós-Graduação em Virologia. Ananindeua, PA, Brasil.pt_BR
dc.degree.grantorInstituto Evandro Chagaspt_BR
dc.degree.levelMestrado Acadêmicopt_BR
dc.contributor.memberDiniz Júnior, José Antônio Picançopt_BR
dc.contributor.memberHolanda, Gustavo Moraespt_BR
dc.contributor.memberQuaresma, Juarez Antônio Simõespt_BR
dc.degree.departmentNúcleo de Ensino e Pós-Graduaçãopt_BR
dc.degree.programPrograma de Pós-Graduação em Virologiapt_BR
dc.degree.date2020-10-13-
dc.degree.localAnanindeua / PApt_BR


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